P-H化合物pKa
对于酸HA,它在水(或者其他溶剂)中会发生一定程度的解离(也可以理解为酸碱反应)。
由于Ka的值可以非常小(10-50)或者非常大(1012),范围跨度很大,因此使用起来不方便。为了方便起见,定义了pKa来表示酸的酸性强度。pKa的大小和化合物本身的结构有关,也和溶剂有关,比如在水中测到的pKa和在DMSO中测到的就不一样(后面还会详细介绍到当配置流动相时,有机溶剂加入缓冲液后引起pKa和pH的变化)。
大部分的用反相色谱分析的化合物都具有一些可离子化的官能团,比如羧基(-COOH)、磺酸基(-SO3H)或者氨基(-NH2)。而在反相色谱中,样品的保留情况和其官能团的离子化状态关系密切,中性态和离子态之间的保留时间往往可以有高达3s的差异。因此如果想要获得好的色谱选择性和保留重复性,对离子化程度的各种影响因素的理解就很重要。
可离子化的分析物的反相保留取决于它们的离子化程度,一般离子化程度越高,在反相固定相(如C18)上的保留越弱,在中性状态时保留最强。而分析物的离子化程度取决于流动相的pH值和分析物的pKa值,因此保留时间也就取决于流动相的pH和分析物的pKa。
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