4.试总结酵母菌的五个特点,并列出各个特点的例外。
个体一般以单细胞非菌丝状态存在,有含真菌丝的酵母菌为细胞相连,竹节状细胞串除外。
(2)多数营出芽生殖一有进行裂殖生殖的酵母菌,裂殖酵母除外。(3)能发酵糖类产能,非发酵糖类酵母菌除外。
(4)细胞壁常含甘露聚,绝大多数的酵母菌细胞壁含甘露聚糖,少数不含。
(5)常生活在含糖量较高,酸度较大的环境中,生活于石油油田中的醇母菌除外。
9.以粗糙脉孢菌为例,简述其菌丝延伸及其成熟过程中细胞壁成分的变化。
答:以粗糙脉孢菌为例,菌丝生长是由菌丝顶端细胞的不断延伸而实现的,随着项端不断向前伸展,细胞壁和细胞质的形态、成分都逐渐变化、加厚并趋向成熟,如图所示。
菌丝尖端细胞的分化过程及其成分变化:
(1)菌丝顶端的延伸区和硬化区:细胞壁的内层是几丁质层,外层为蛋白质层:
(2)亚顶端部位即次生壁形成区:由内至外是几丁质层、蛋白质层和葡聚糖蛋白网层:(3)成熟区:由内至外相应地为几丁质层、蛋白质层、葡聚糖蛋白网层和葡聚糖层:(4)隔膜区:它是由菌丝内壁向内延伸而成的环片状构造。
13.为何现代学术界总是把蕈菌作为微生物学的研究对象,而不是植物学的研究对象?
(1)从进化历史,细胞结构,早期发育特点,各种生物学特性和研究方法等方面来考察,都可以证明它们与其他典型的微生物一显微真菌完全-致。
(2)若将其大型子实体理解为一般真菌菌落在陆生条件下的特化与高度发展形式蕈菌就与其他真菌无异。
15.试比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同,并提出制备相应原生质体的酶或试剂。
答: (1)细菌分为G+和G-
①G肽聚糖和磷壁酸含量较高,脂质一般无,不含蛋白质,其原生质体制备:使用青霉素、溶菌酶进行处理。
②G肽聚糖含量低,不含磷壁酸,脂质与蛋白质含量较高,其原生质体制备:使用EDTA鳌合剂处理,溶菌酶进行处理。
(2)放线菌为G,其细胞壁具有G所具有的特点。放线菌原生质体制备:青霉素、溶菌酶处理细胞壁。
(3)酵母菌和霉菌为真菌,酵母菌的细胞壁外层为甘露聚糖,内层为葡聚糖:而霉菌的细胞壁成分为几丁质、蛋白质、葡聚糖。
酵母菌原生质体制备:蜗牛消化酶处理细胞壁。霉菌原生质体制备:纤维素酶处理细胞壁。
16.请简单综述一下辈菌的分类地位、已记载种数、食用和药用种类的数目、食用菌产业的优势和我国有关研究生产概况等信息。
答: (1)蕈菌又称伞菌,是指能形成大型肉质子实体的真菌,包括大多数担子菌和极少数的子囊菌类。
(2)全球可供食用的蕈菌种类有2000多种,其中我国有1500 余种,目前已鉴定的食用菌已有981种,其中92种已驯化,62 种已能进行人工栽培。
(3)食用菌产业的优势和我国有关研究生产既况:食用菌产业是“五不争”产业,不与人争粮,不与粮争地,不与地争肥,不与农争时,不与其它行业争资源,从而使食用菌成了我国第六大农产品。我国成为全球第一大食用菌生产和出口大国。
1.病毒的一般大小如何?与原核生物和真核生物细胞有何大小上的差别?最大的病毒和最小的病毒(不计亚病毒因子)是什么?
答:①它们的直径多在100m(20~200nm)上下,
②病毒、细菌和真菌这3类微生物个体直径比约为1:10:100
③最大: 400nm的拟菌病毒和另一种海洋原生动物病毒最小:环形病毒科的猪圆环病毒(PCV)和长尾鹦鹉喙羽病毒(PBFDV)。,
13.什么是效价?测定噬菌体效价的方法有几种?最常用的是什么方法,其优点如何?
答: (1)效价的定义效价又称噬菊斑形成单位数或感染中心数,是指表示每毫升试样中所含有的具有侵染性的噬菌体粒子數。(2)效价的测定方法主要包括:斑点试验法、液体稀释管法、双层平板法、单层平板法和玻片快速法。(3)效价测定最常用的方法及优点效价测定最常用方法为双层平板法,此方法的优点:①可弥补培养皿底部不平的缺陷:②可使所有的噬菌斑都位于近乎同-平面上,因而大小-致、边缘清晰且无重叠现象:③可形成形态较大、特征较明显以及便于观察和计数的噬菌斑。
16、什么是溶源菌,它有何特点?如何检出溶源菌?
答:①溶源菌是-类被温和噬菌体感染后能相互长期共存,-般不会出现迅速裂解的宿主细胞。
②溶源性的特点: a自发裂解
③将少量溶源茵与大量的敏感性指示性茵(遇溶源菌裂解后所释放的温和噬茵体的大肠杆菌)相混合,然后与琼脂培养基混匀后倒一个平板,经培养后溶源菌就一-一长出菌落。由于溶源菌在细胞分裂过程中有极少数个体会引起自发裂解,其释放的噬菌体可不断侵染溶源菌周围的指示菌菌苔,于是就形成了一个个中央有溶源茵的小菌落,四周有透明圈围着的这种特殊溶源菌。
20、用发酵的纯菌做两组平板(都要那种长成菌苔的),其中一组加入合适浓度的发酵液,另一组加入同浓度的新鲜培养基或未染噬菌体的发酵液,培养--段时间后观察,若出现空白斑,则为有噬菌体或者:噬菌体有烈性的和非烈性噬菌体。烈性的噬菌体侵染细菌后会快速造成细菌菌体裂解,培养液呈现清凉透明有破碎残渣。非裂解性的可以铺顶层琼脂板(可以查阅噬菌体滴度的测试实验方案),培养后看顶层琼脂层中有没有噬菌斑,也可以在底层培养基中加些IPTG/X-gal若噬菌体带有lacZ的还有蓝白斑筛选的作用(如M13KE的噬菌斑显现蓝斑)。不知道你的菌是否是抗性菌,可以找些xL1-blue (Tet 抗性)加抗性培养一段时间到对数期再接种你认为有噬菌体污染的样品(非Tet抗性)后铺顶层琼脂培养查看噬菌斑。M13噬菌体侵染细菌一般需要细菌带有F-pilus (性菌毛)才可以介导噬菌体的侵染过程。这一类的雄性菌比如TG1、xL1-blue 等。
21、预防噬菌体污染的措施主要有:
(1)决不使用可疑菌种认真检查斜面、摇瓶及种子罐所使用的菌种,坚诀废弃任何可疑菌种。
(2)严格保持环境卫生。
(3)诀不排放或随便丢弃活菌液环境中存在活菌,就意味着存在噬菌体赖以增殖的大量宿主,其后果将是极其严重的。为此,摇瓶菌液、种子液、检验液和发酵后的菌液绝对不能随便丟弃或排放;正常发酵液或污染噬菌体后的发酵液均应严格灭菌后才能排放;发酵罐的排气或逃液均须经消毒、灭菌后才能排放。
(4)注意通气质量空气过滤器要保证质量并经常进行严格灭菌,空气压缩机的取风口应设在30~40米高空。
(5)加强管道及发酵罐的灭菌。
(6)不断筛选抗性菌种,并经常轮换生产菌种。
(7)严格执行会客制度。
如果预防不成,-旦发现噬菌体污染时,要及时采取合理措施。例如,①尽快提取产品,如果发现污染时发酵液中的代谢产物含量已较高,即应及时提取或补加营养并接种抗噬菌体菌种后再继续发酵,以挽回损失,②使用药物抑制,目前防治噬菌体污染的药物还很有限,在谷氨酸发酵中,加入某些金属螯合剂(如0.3~0.5%草酸盐、柠檬酸铵)可抑制噬菌体的吸附和侵入;加入1~2μ g/ml金霉素、四环素或氯霉素等抗生素或0.1~0.2%的“吐温60”、“吐温20”或聚氧乙烯烷基醚等表面活性剂均可抑制噬菌体的增殖或吸附;③及时改用抗噬菌体生产菌株。
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